來源:藥師答疑解惑 時間:2022-07-19
陸續(xù)推出系列MALDI-TOF MS的真真假假(僅涉及微生物方向,對于其他方向另議),供各位朋友交流,本交流僅代表個人觀點,與所在單位無關(guān),僅供娛樂參考,如果您認(rèn)為有用,就轉(zhuǎn)發(fā)并關(guān)注公眾號,后續(xù)還有幾篇......
第一篇:MALDI-TOF MS檢測的是蛋白嗎?(已發(fā)布,請在本公眾號中尋找原文)
簡介:已知的蛋白可以在MALDI-TOF質(zhì)譜上出峰,而未知樣品的MALDI-TOF質(zhì)譜峰不一定是蛋白峰,MALDI-TOF MS檢測微生物就是檢測未知樣本,因此MALDI-TOF MS檢測不一定是蛋白,更不是核糖體蛋白,是什么MALDI-TOF的技術(shù)做不到,僅知道是質(zhì)荷比。
第二篇:通過得分就能判斷鑒定到種或鑒定到屬嗎?
臨床微生物行業(yè)的圣經(jīng)級參考書CLSI M58,國內(nèi)多篇MALDI-TOF質(zhì)譜專家共識以及一些MALDI-TOF質(zhì)譜廠家的技術(shù)文件,一致認(rèn)為得分的高低可以判定鑒定到種水平或鑒定到屬水平或無法鑒定,要了解是否是真的,需要先知曉微生物質(zhì)譜建庫的模式,目前市面上流行的微生物建庫模式大概兩類:
第一:按照種比對建庫,不同來源的同一種菌(比如世界各地或全國各地不同實驗室的100株ECO),進(jìn)行質(zhì)譜圖采集(假設(shè)每一株菌采集20個峰圖,該種菌共計50株),再把所有峰圖(20*50=1000)疊加,后形成該種菌的標(biāo)準(zhǔn)譜圖或質(zhì)譜圖權(quán)重表,示例圖1,圖中形狀代表菌種,顏色代表不同來源的菌株,六角形這種菌數(shù)據(jù)庫譜圖是由10株不同來源六角形菌的譜圖擬合疊加而成。數(shù)據(jù)庫多少種菌就有多少個譜圖。
數(shù)據(jù)庫比對:一個未知峰圖與數(shù)據(jù)庫中每種菌的峰圖進(jìn)行比較,得出與該種屬菌的匹配性(一般用百分?jǐn)?shù)表示),見圖2。
第二:按照株比對建庫,一株菌采集不同多個峰圖(假設(shè)每一株菌采集20個峰圖),將這20個峰圖疊加形成該株菌的峰圖,示例圖3,5株六角形菌譜圖都在數(shù)據(jù)庫里,只有1株四角形菌,數(shù)據(jù)有多少株菌,就有多少個譜圖。比如某廠家質(zhì)譜宣傳數(shù)據(jù)庫能鑒定4000種,10000株,即平均每種菌只有2.5個菌株,估計有3000種以上的菌只有1株菌。
數(shù)據(jù)庫比對:一個未知峰圖與數(shù)據(jù)庫中每株菌的峰圖進(jìn)行比較,得出與該株菌的匹配性(一般用數(shù)字表示,不同質(zhì)譜廠家表現(xiàn)形式各異),見圖4。一般提示前十名或前二十名菌株信息。
綜上所述,不論哪一種比對算法,從得分上都不能確定鑒定到屬,得分僅能顯示所測菌的峰圖與建數(shù)據(jù)庫時該種菌或該株菌的峰圖匹配性。
第一種按種比對建庫還能確定到種,第二種只能到株,如果到種還需要進(jìn)一步運算。
第二種按株比對算法可能出現(xiàn):
(1)前十名都在規(guī)定的分?jǐn)?shù)以上,但出現(xiàn)不同種屬時,需要對結(jié)果進(jìn)行復(fù)核測試。
(2)前十名都小于規(guī)定的分?jǐn)?shù),但出現(xiàn)同一種菌時,其結(jié)果也可能是對的,只不過該菌譜圖與建庫菌的譜圖匹配性略低。
【來源:摘自藥師答疑解惑】
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