來源:科技部 時間:2021-01-06
近年來隨著DNA測序技術的蓬勃發(fā)展,蛋白質(zhì)結合位點的高通量鑒定、染色質(zhì)可及性及甲基化狀態(tài)分析等檢測技術不斷涌現(xiàn),其中很多技術(如DNase-seq和ATAC-seq等)依賴于開放性染色質(zhì)對轉(zhuǎn)座酶等的敏感性。在這些新技術中,全基因組核小體定位及DNA甲基化組測序技術(NOMe-seq)能夠利用外源性M. CviPI GpC甲基轉(zhuǎn)移酶標記基因組可及性區(qū)域,結合亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換,NOMe-seq能夠同時檢測內(nèi)源性胞嘧啶甲基化和核小體開放性狀態(tài)。
納米孔測序(Nanopore sequencing, 又稱第四代測序)是近年來興起的新一代單分子測序技術,具有測序讀長(reads)長(>150 kb),速度快,測序數(shù)據(jù)實時監(jiān)控,機器方便攜帶等優(yōu)點。之前研究已證明納米孔測序能夠檢測內(nèi)源性CpG甲基化,并能對酵母甚至人類細胞的染色質(zhì)可及性位點進行外源標記。
2020年11月23日,約翰霍普金斯大學Winston Timp教授領導的研究團隊在Nature Methods雜志發(fā)表了題為“Simultaneous profiling of chromatin accessibility and methylation on human cell lines with nanopore sequencing”的研究論文,作者通過GpC甲基轉(zhuǎn)移酶外源性標記開放染色質(zhì)后,利用納米孔測序技術(nanoNOMe-seq)同時檢測了人類細胞中的內(nèi)源性CpG甲基化狀態(tài)和染色質(zhì)可及性的階段性模式,構建了涵蓋甲基化和染色質(zhì)開放性信息等在內(nèi)的人類細胞表觀基因組,并利用該技術揭示了乳腺癌細胞和非癌細胞間的表觀遺傳差異。nanoNOMe-seq為我們揭示人類發(fā)育與疾病發(fā)生中復雜的染色質(zhì)表觀遺傳學特征提供了新的技術支持。
論文鏈接:https://doi.org/10.1038/s41592-020-01000-7