2018-01-24 CICC菌種平臺
基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作為新興的微生物快速鑒定方法,是目前國內(nèi)外微生物快速鑒定的研究熱點,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域等多學(xué)科。國家標(biāo)準(zhǔn)委發(fā)布了《基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜鑒別微生物方法通則》(GB/T 33682-2017)標(biāo)準(zhǔn)文本,并于2017年12月1日開始實施。美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)發(fā)布了《Methods for the Identification of Cultured Microorganisms Using Matrix-Assisted Laser Desorption /Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry 》,MALDI-TOF MS已經(jīng)成為微生物菌種鑒定的標(biāo)準(zhǔn)方法。
每一種微生物都有其特征的蛋白指紋圖譜,基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)基于微生物核糖體等高豐度穩(wěn)定表達的特征蛋白指紋圖譜進行快速菌種鑒定。MALDI-TOF MS原理是將樣品與小分子基質(zhì)的混合溶液加在靶盤上,待溶劑揮發(fā)后形成共結(jié)晶,用激光照射晶體時,基質(zhì)分子吸收能量與樣品解吸附并使其電離,采用不同的飛行時間分析器檢測帶電荷的分析物,從而獲得樣品的質(zhì)量信息。通過MALDI-TOF MS分析獲得微生物菌種核糖體蛋白指紋圖譜,與已知微生物菌種蛋白指紋圖譜數(shù)據(jù)庫比對分析后,實現(xiàn)微生物菌種的快速鑒定。MALDI-TOF MS數(shù)據(jù)庫中菌株種類豐富,來源廣泛,不僅涵蓋了臨床來源的常見致病菌,而且包括工業(yè)生產(chǎn)中出現(xiàn)頻率高的Enterobacteriaceae、Staphylococcus、Listeria、Bacillus、Bifidobacterium、Lactobacillus、Candida、 Aspergillus和Penicillium 。
中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC)作為國內(nèi)最大規(guī)模的微生物菌種保藏管理、鑒定評價和進口的專業(yè)機構(gòu),長期從事微生物菌種鑒定與評價工作。CICC擁有國內(nèi)第一臺MALDI-TOF MS(smart)設(shè)備,與MALDI-TOF MS(Microflex)相比,光源頻率更加穩(wěn)定,運行分析速度和鑒定準(zhǔn)確率顯著提高,鑒定數(shù)據(jù)庫來源廣泛,種類豐富,包括細菌、酵母菌和絲狀真菌在內(nèi)的2498個種,7676個菌株。能夠高通量進行微生物菌種快速鑒定,96個樣品從挑取平皿培養(yǎng)物到完成鑒定僅需1 h,顯著縮短了微生物菌種鑒定周期。目前已面向廣大食品、藥品、化妝品等工業(yè)企業(yè)、檢測機構(gòu)、高校及科研單位提供MALDI-TOF MS快速菌種鑒定服務(wù)。
MALDI-TOF MS