導(dǎo)讀: 6月15日-17日,中國檢驗醫(yī)學(xué)界一年一度的學(xué)術(shù)盛會——“2017中國醫(yī)師協(xié)會檢驗醫(yī)師年會暨第十二屆全國檢驗與臨床學(xué)術(shù)會議”在西安曲江國際會議中心隆重舉行。會議邀請了國內(nèi)外知名專家學(xué)者,共同探索檢驗醫(yī)學(xué)發(fā)展方向,為臨床檢驗工作者、醫(yī)院管理者以及檢驗專家獲得新技術(shù)、新方法、新理念提供了重要平臺。
[ 大會報告:GBS檢測專題 ]
質(zhì)譜技術(shù)已成為繼分子生物學(xué)后推動臨床檢驗發(fā)展的重要技術(shù)。為更好地推動質(zhì)譜技術(shù)在臨床檢驗中的應(yīng)用,6月16日中午的飛行時間質(zhì)譜專題衛(wèi)星會,著力于圍繞質(zhì)譜技術(shù)的前沿應(yīng)用,囊括質(zhì)譜平臺臨床應(yīng)用的多個方面。其中,來自北京大學(xué)深圳醫(yī)院的劉小平主任就我國現(xiàn)行極為重視的優(yōu)生優(yōu)育問題和產(chǎn)前微生物檢測方向做了精彩的報告,報告題目為“晚孕婦女陰道分泌物B群鏈球菌篩查及質(zhì)譜檢測”。
劉主任首先就B族鏈球菌(GBS)對新生兒的感染部位、感染途徑以及癥狀做了概述性的講解。隨后,劉主任從流行病學(xué)、孕婦攜帶率及危害等角度逐漸展開對GBS的介紹。GBS首次被報告于1938年,為產(chǎn)褥期敗血癥病原菌。1970年才被臨床醫(yī)生重視,目前 GBS已被證實為圍產(chǎn)期母嬰感染的主要致病菌之一,是嬰幼兒敗血癥、肺炎和腦膜炎最常見的原因。
然而,10%-30%孕婦的陰道和直腸定植GBS,大多數(shù)情況下無癥狀。但2%-4%孕婦發(fā)生GBS尿路感染,亦有極少數(shù)孕婦在懷孕期間發(fā)生胎膜早破、羊膜炎、子宮內(nèi)膜炎、產(chǎn)褥感染、早產(chǎn)、敗血癥等。同時,當(dāng)妊娠期婦女有肥胖、妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓、多次妊娠、低齡或高齡等危險因素時,則更容易感染GBS。同時,母親攜帶的B族鏈球菌極易傳染給新生兒,可以是出生前的逆行感染,也可以是分娩過程中羊水吸入,引發(fā)新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥,導(dǎo)致耳聾、視力受損、發(fā)育障礙、腦癱等后遺癥。GBS對新生兒的感染根據(jù)發(fā)病時間可分為早發(fā)型和晚發(fā)型,早發(fā)型占新生兒GBS感染的80%,一般在出生后6-12小時發(fā)病,尤其是早產(chǎn)兒,主要通過母嬰垂直傳播,其臨床表現(xiàn)為肺炎和敗血癥;而晚發(fā)型占新生兒GBS感染的20%,多在出生5天到7周之內(nèi),這類患兒會通過水平和垂直兩種方式傳播,其臨床表現(xiàn)為腦膜炎。
目前,B鏈的檢測可通過直接染色進(jìn)行革蘭氏鏡檢,除此之外還可進(jìn)行分離培養(yǎng)找出標(biāo)準(zhǔn)菌落,再通過免疫、乳膠凝集試驗、質(zhì)譜等不同的鑒定方法對GBS進(jìn)行檢測并得出報告。
傳統(tǒng)檢驗方法在GBS感染性疾病診斷方面面臨著樣本流轉(zhuǎn)時間 (turn- around-time,簡稱TAT) 長等重大問題,盡管市面上已有大量自動檢測方法,但大多還是基于微生物生物化學(xué)反應(yīng)原理,雖能縮短TAT,但仍不能實現(xiàn)真正的快速鑒定。PCR檢測步驟復(fù)雜,技術(shù)操作要求高,檢測需要時間相對較長,切易出現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象。而MALDI-ToF檢測B族鏈球菌會大大縮短檢測時間,無需冗長步驟,具有很大優(yōu)勢。
劉主任的團(tuán)隊在北大深圳醫(yī)院連續(xù)收集了產(chǎn)檢門診孕35-37周女性陰道分泌物拭子。進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定,再利用MALDI-ToF技術(shù)進(jìn)行檢測驗證。其中,在2016年收集到的120株B群鏈球菌,通過Clin-ToF II(北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司生產(chǎn))質(zhì)譜分析結(jié)果,Clin-ToF微生物快速檢測平臺通過分析和比對微生物的16s核糖體蛋白指紋圖譜,僅需要2小時左右便可快速準(zhǔn)確檢測出GBS,相比基于生化方法的檢測方法節(jié)省了大量時間和耗材,其結(jié)果與生化鑒定結(jié)果符合率100%。實際檢測過程如下所示。
鑒定報告后,通過使用抗生素可對GBS感染進(jìn)行預(yù)防治療,根據(jù)美國CDC 《圍產(chǎn)期GBS預(yù)防指南》中的介紹,許多GBS菌株具有耐藥性,如侵襲性GBS疾病的許多菌株對克林霉素或紅霉素有抗藥性。因此,需對GBS不同菌株進(jìn)行藥敏測試,結(jié)果選用相應(yīng)的抗生素對圍產(chǎn)期孕婦進(jìn)行預(yù)防或治療。
綜上所述,GBS在孕婦和新生兒疾病篩查中至關(guān)重要,然而B群鏈球菌的鑒定手段將不限于生化鑒定,質(zhì)譜作為一種新出現(xiàn)的分析手段會廣泛用于菌株鑒定并對實驗的驗證起到快速準(zhǔn)確的作用。同時,乳膠凝集試驗是有用的篩查試驗,而如何正確使用抗生素對GBS感染進(jìn)行預(yù)防和治療也成為現(xiàn)行關(guān)注的重要課題。
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