來源:藥師答疑解惑 時間:2022-07-19
之所以為“戲說”,只是從過往經(jīng)驗中總結(jié)而已,您如果認為是對的,就分享給更多的朋友,如果是錯誤的觀點不代表本人所在單位圖片,您如果有啥疑問可以私信wangyaoshi119或留言,共同交流,或許會給您的工作做點小貢獻
要說清楚“飛行時間原理”應了解一個物理知識“動能”,即物體由于運動而具有的能量,用E表示,其中:m表示質(zhì)量,v表示速度,L表示運動的距離,t表示運動L所用的時間,兩個物質(zhì)(m1和m2)能量相等,運動距離相等,就有下面的推導過程:
由以上公式可得:運動相同的距離,質(zhì)量與時間的平方成正比。
看MALDI-TOF MS的峰圖,橫坐標標稱為質(zhì)荷比(質(zhì)量電荷比),并等差均勻分布,結(jié)合上面的公式推導,橫坐標實則是時間的平方。
看一個MALDI-TOF MS校準數(shù)據(jù)
將Mass與Time兩列做個作圖
由此可見Time列就是時間的平方值,開平方后得到t值
再看MALDI-TOF MS的峰圖,4365有個峰即為297.34納秒時檢測器檢測到正電荷離子(微生物質(zhì)譜一般是正離子模式),7158有個峰即為336.44納秒時檢測器檢測到正電荷離子,峰的高低表示該時間點到達檢測器的電荷的量,也稱電壓強度,即質(zhì)譜峰圖的縱坐標。
另外4365是單一物質(zhì)還是混合物質(zhì)不清楚,是什么結(jié)構(gòu)也不清楚,它僅能反饋出在297.34納秒這個時間點檢測器上有電荷。
綜上所述:MALDI-TOF MS的峰圖只是一個飛行時間和電壓的二維圖,至于檢測的是什么物質(zhì),飛行時間質(zhì)譜這個技術(shù)做不到,這個技術(shù)在2002年獲得諾貝爾獎,火了一下,由于這個技術(shù)本身的局限性,直到微生物的應用,才真的火起來,關(guān)于微生物質(zhì)譜有系列真真假假的事情(本公眾號上已推出三篇,還有后續(xù)),如果您明白了原理,一些假說不攻自破。
請記住下面的話應該是正確的:
已知的蛋白可以在MALDI-TOF MS上出質(zhì)譜峰,如已知分子量2000的蛋白,可能在2000位置出一個峰(單電荷峰),也可能在1000位置出一個峰(雙電荷峰),即MALDI-TOF MS檢測的是蛋白。
未知樣品的MALDI-TOF MS質(zhì)譜峰不一定是蛋白峰,是什么?MALDI-TOF MS這個技術(shù)做不到檢測的是什么物質(zhì),它只是一個飛行時間和電壓的二維圖,微生物檢測就是一個未知樣品。
已知的核酸在MALDI-TOF MS上出質(zhì)譜峰就是核酸峰,即核酸檢測功能。
【來源:摘自藥師答疑解惑】
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